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在色谱剖析中柱长、柱内径、柱温、载气流速、牢靠相、进样等操作条件对疏散的影响

2011-01-01 [2999]
操作条件关于色谱疏散有很大影响。
    
1、柱长 ,柱内径:一样平常讲 ,柱管增添 ,可改善疏散能力 ,短则组分馏出的快些;柱内径小疏散效果好 ,柱内径大处置惩罚量大 ,但柱内径过大 ,将导致担体不可匀称地漫衍在色谱柱中。剖析用柱管一样平常内径为3-6毫米 ,柱长为1-4米。
    
2、柱温:是一个主要的操作变数 ,直接影响疏散效能和剖析速率。选择柱温的凭证是混淆物的沸点规模 ,牢靠液的配比和判断器的迅速度。提高柱温可缩短剖析时间;降低柱温可使色谱柱选择性增大 ,有利于组分的疏散和色谱柱稳固性提高 ,柱寿命延伸。一样平常接纳即是或高于数十度于样品的平均沸点的柱温为较合适 ,对易挥发样用低柱温 ,不易挥发的样品接纳高柱温。
    
3、载气流速:载气流速是决议色谱疏散的主要缘故原由之一。一样平常讲流速高色谱峰狭 ,反之则宽些 ,但流速过高或过低对疏散都有倒运的影响。流速要求要平稳 ,常用的流速规模每分钟在10-100亳升之间。
    
4、牢靠相:牢靠相是由固体吸附剂或涂有牢靠液的担体组成。
    
(1)固体吸附剂或担体粗细:一样平常接纳40-60目、60-80目、80-100目。当用一律长度的柱子 ,颗粒细的疏散效率就要比粗的好些。
    
(2)牢靠液含量:牢靠液含量对疏散效率的影响很大 ,它与担体的重量比一样平常用15%-25%。比例过大有损于疏散 ,比例过小会使色谱峰拖尾。
    
5、进样:一样平常讲进样快 ,进样量小 ,进样温度高其疏散效果好。对进液体样 ,速率要快 ,汽化温度要高于样品中高沸点组分的沸点值 ,一次汽化 ,包管色谱峰形不致展宽、使柱效高。当进样量在一定限度时 ,色谱峰的半峰宽是稳固的。若进样量过多就会造成色谱柱超载。一样平常讲柱长增添四倍 ,样品的允许量增添一倍。关于通例剖析 ,液体进样量为1-20微升;气体进样量为0、1-5毫升。
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