高效液相色谱仪操作历程及注重事项
高效液相色谱仪操作是应注重什么:
1、液相色谱仪的流动响应接纳色谱纯溶剂,以知足要求、阻止损坏色谱柱
2、待剖析的样品必需彻底消融澄清、过滤,以阻止梗塞、损坏色谱柱;
3、液相色谱仪流动相需经由滤、除气后方可使用;
4、严禁使用有污染的水等冲洗色谱柱,阻止将互不相溶的溶剂一同进入泵内;
5、液相色谱仪剖析完成后,须注重实时洗濯色谱柱和检测器的比色池。
高效液相色谱仪的操作历程如下:
1.掀开HPLC事情站(包括盘算机软件和色谱仪),衔接好运动相管道,衔接检测系统。
2.对抽滤后的运动相举行超声脱气10-20分钟。
3.过滤运动相,凭证需求挑选纷歧样的滤膜。
4进入HPLC操控界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。
5.有一段时刻没用,或许换了新的运动相,需求先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需求在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速率不要逾越10ml/min。
6.调理流量,初度运用新的运动相,能够先试一下压力,流速越大,压力越大,通常不要逾越2000。点击injure,选用相宜的流速,点击on,走基线,视察基线的状态。
7.妄想走样步伐。点击file,选择select?users?and?methods,能够选择现有的种种走样步伐。若需树立一个新的步伐,点击new?method。选择需求的配件,包括进样阀,泵,检测器等,凭证需求而纷歧样。选完后,点击protocol。一个完整的走样步伐需求包括:a.进样前的稳流,通常2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject变换;d.走样时刻,随纷歧样的样品而纷歧样。
8.进样和进样后操作。选定走样步伐,点击start。进样,一切的样品均需过滤。步伐走完后,点击postrun,可纪录数据和做符号等。悉数样品走完后,再用上面的步伐走一段基线,洗掉剩余物。
9关机时,先关盘算机,再关液相色谱仪。